如何测定叶绿素含量
如何测定叶绿素含量
一、原理
根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。
二、材料、仪器设备及试剂
(一)材料:新鲜(或烘干)的植物叶片。
(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 电子顶载天平(感量0.01g);3. 研钵;4. 棕色容量瓶;5. 小漏斗;6. 定量滤纸;7. 吸水纸;8. 擦境纸;9. 滴管。
(三)试剂:96%乙醇(或80%丙酮);石英砂;碳酸钙粉。
三、实验步骤
1. 取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀。2. 称取剪碎的新鲜样品0.2g,共3份,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及2~3ml95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置3~5min。3. 取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。4. 用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml,摇匀。5. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白,在波长665nm、649nm下测定吸光度。
四、实验结果计算:将测定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度(Ca、Cb:mg/L),二者之和为总叶绿素的浓度。最后根据下式可进一步求出植物组织中叶绿素的含量:
叶绿素的含量(mg/g)= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重(或干重)。
轻微发青的土豆能吃吗
无腐烂变质的,削去发青的部分能吃。
土豆变成青绿色,是因为在存储的过程中长时间接触到了阳光,土豆再次生长,表皮产生光合作用,内部出现大量的叶绿素,导致其颜色变绿,而变绿的土豆中除了含有较多的叶绿素外,还有大量的龙葵素,不过这种有毒物质大多聚集在土豆发青的部分,如削去发青的部分,未发现剩余土豆有腐烂变质的,其龙葵素含量在可食安全范围内,是可以吃的。
女性冬天喝什么茶好 绿茶
过敏体质喝绿茶易呕吐。中国大部分名茶都为绿茶,由于制作工艺中没有发酵环节,所以营养成分较之其他类高,但叶绿素含量也较多,对肠胃刺激较大,胃溃疡病患者不能喝绿茶。
常吃芹菜有什么好处 芹菜怎么保存最好
储存适宜竖着存放。垂直放的蔬菜所保存的叶绿素含量比平放的蔬菜要多,且存放时间越长,差异越大。
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大力水手实名推荐,其蛋白质和叶绿素含量在蔬菜中遥遥领先,并且含有蔬菜中稀有的维生素K,能够帮助安神,稳定情绪的作用。
怎样挑选优质黑米 黑米的营养价值
1、黑米中的微量元素比白米丰富,其中钾元素含量是普通大米的4.4倍之多。
2、黑米中含有的B族维生素(除了B12)含量极其丰富,它的B族维生素含量是普通大米的4倍之多。
3、黑米所含锰、锌、铜等无机盐大都比大米高1~3倍,更含有大米所没有的维生素C、叶绿素、花青素、胡萝卜素及强心甙等特殊成分。
马铃薯青皮了能不能吃
无腐烂变质的,削去青皮的部分可以吃。
土豆变成青绿色,是因为在存储或生长的过程中长时间接触到了阳光,导致土豆表皮产生光合作用,内部出现大量的叶绿素,使其颜色变青,而变绿的土豆中除了含有较多的叶绿素外,还有大量的龙葵素,不过这种有毒物质大多聚集在土豆发青的部分,如削去发青的部分,未发现剩余土豆有腐烂变质的,其龙葵素含量在可食安全范围内,是可以吃的。
绿豆为什么会变成紫色的
绿豆怕光,所以在浇水时如果见光,甚至是日光灯的光,就会变紫色,带苦味。
具体的科学依据是:种子发芽以后,叶绿体逐渐减少,这时因为叶绿体中的色素含有Mg离子,在根吸收的营养中很大一部分是有机物,而有机物可以和叶绿素发生反应,即生成镁的沉淀,形成去镁叶绿素,从而显紫色.你应该是教师吧,可以做 叶绿素的提取和分离 实验,不加碳酸钙,研磨液显紫色,可以证明是因为叶绿素变质才变为紫色.
所以别害怕,相信科学,相信生物,相信自然。
什么是叶绿素
叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,是一类含脂的色素家族,位于类囊体膜。
叶绿素吸收大部分的红光和紫光但反射绿光,所以叶绿素呈现绿色,它在光合作用的光吸收中起核心作用。
叶绿素为镁卟啉化合物,包括叶绿素a、b、c、d、f以及原叶绿素和细菌叶绿素等。叶绿素不很稳定,光、酸、碱、氧、氧化剂等都会使其分解。
酸性条件下,叶绿素分子很容易失去卟啉环中的镁成为去镁叶绿素。
叶绿素有造血、提供维生素、解毒、抗病等多种用途。
土豆怎么保存不发绿不长芽 储存导致的土豆发青
削去发青的部分再食用。
在土豆存储的过程中,如果长时间接触阳光的话,土豆会再次生长,进行光合作用,土豆内部会出现大量的叶绿素,导致其颜色变绿,而变绿的土豆中除了含有较多的叶绿素外,还有大量的龙葵素,不过这种有毒物质大多聚集在土豆发青的部分,如削去发青的部分,未发现剩余土豆有腐烂、变质的,其龙葵素含量在可食安全范围内,是可以吃的。