尖锐湿疣的五大诊断
尖锐湿疣的五大诊断
一、基因诊断迄今，HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测，主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点，为HPV检测开辟了新途径。
(一)标本的采集及处理标本的采集和预处理：用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时，将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中，用PBS离心(3000g，10min)洗涤2次，沉积细胞重悬于1mlPBS中，取0。5ml细胞悬液抽提DNA。
标本核酸的提取：按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液(10mmol/LTris-HCl，pH7.4，10mmol/LEDTA，150mmol/LNaCl，0.4%SDS，1.0mg/ml蛋白酶K)37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1：1)，氯仿/异戊醇(24：1)各抽提2次;加1/10体积3mol/LNaAc(pH5.2)及2.5倍体积无水乙醇置-20℃2h或过夜沉淀DNA;加1体积乙醇洗涤1次;用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/LTris-HCl，pH8.0，1.0mmol/LEDTA)溶解DNA，37℃温育30min。
(二)PCR扩增引物设计和合成：HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L)，每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列分析表明，各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1，该引物与HPV6、11、16、18及33型有互补序列，也可扩增其它型HPV。
反应试剂：TaqDNA聚合酶(2U/ml)、10mmol/LdNTP贮备液(dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L)，10×PCR缓冲液(500mmolKCl、40mmol/LMgCl2、100mmol/LTris-HCl、pH8.5)，100μmol/LMY11和MY09贮备液，灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。
扩增方法和程序：以100μlPCR反应液，用无菌0。5ml硅化塑料离心管为反应管进行扩增反应。
实验前配制预混反应试剂并分装。预混反应试剂包括除标本DNA外的其它各种PCR反应试剂。
各反应管依次加入10μl标本和90μl预混反应试剂。
加入80-100μl石蜡油，在台式离心机上快速离心数秒钟，使各反应试剂收集于油层下。目前，PCR试剂已商品化，反应体积为25μl。使用时只加入标本DNA即可。
将反应管置PCR扩增仪上，循环参数为95℃30s，55℃40s，72℃50s循环35次，最后72℃延伸5min。
每次试验应设阳性及阴性对照。以载有HPV的重组质粒(每反应为100pg)或含有HPV的细胞系(如Caski、HeLa)DNA为阳性对照，以无HPV的人细胞系DNA为阴性对照。
(三)扩增产物的检测和分析凝胶电泳：扩增反应结束后，取出反应管，冷却至室温，取10μl扩增产物用5%-7%聚丙烯酰胺凝胶或1.5%琼脂糖电泳，溴化乙锭染色，紫外分析仪下分析结果，分子量约为450bp处出现明显的DNA带。
核酸杂交：如果凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时，可用标记的公用混合探针和(或)型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。
按照标准方法制32PATP标记的寡核苷酸探针，需达到约107cpm/pmol特异活性。杂交液中需含有2×106-5×106cpm探针/ml。在55℃缓慢振荡下杂交2-3h，随后于30-55℃下用洗涤液(2×SSC、0.1%SDS)迅速冲洗杂交膜，除去多余探针。
然后进行洗膜，其条件依所用探针而异：公用混合探针，55℃洗膜10min;MY12、MY13及MY16探针，56-57℃下10min，并换液重洗1次;MY14及WD74探针，58-59℃下10min，亦换液重洗1次。
用PCR方法检测HPV比核酸杂交方法优越。其敏感性高，GP-PCR方法以凝胶电泳直接分析结果，可检出标本中200个拷贝的HPVDNA，若以核酸杂交检测PCR产物，敏感性提高，能检出10个拷贝的HPVDNA。
鉴于PCR技术的高度敏感性，以生殖道脱落细胞为检材足以满足试验要求，避免了活检取材、研磨组织繁杂操作。一般情况下，PCR扩增产物经凝胶电泳，观察产生的DNA可直接作出诊断。因此，PCR技术检测HPV实验周期短、简便快速。
二、免疫组织学检查常用过氧化物酶抗过氧化物酶方法(即PAP)，显示湿疣内的病毒蛋白，以证明疣损害中有病毒抗原。HPV蛋白阳性时，尖锐湿疣的浅表上皮细胞内可出现淡红色的弱阳性反应。
三、组织化学检查取少量病损组织制成涂片，用特异抗人类乳头瘤病毒的抗体作染色。如病损中有病毒抗原，则抗原抗体结合。在过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)方法中，核可被染成红色。此法特异性强且较迅速，对诊断有帮助。
四、病理检查主要为角化不全，棘层高度肥厚，乳头瘤样增生，表皮突增厚，延长，其增生程度可似假性上皮瘤样。刺细胞和基底细胞并有相当数量的核分裂、颇似癌变。但细胞排列规则，且增生上皮和真皮之间界限清楚。其特点为粒层和刺层上部细胞有明显的空泡形成。此种空泡细胞较正常大，胞浆着色淡、中央有大而圆，深嗜碱性的核。
通常真皮水肿、毛细血管扩张以及周围较致密的慢性炎性浸润。Bushke-loewenstein巨大型尖锐湿疣，表皮极度向下生长，代替了其下面的组织、易与鳞状细胞相混，故须多次活检。若有缓慢发展之倾向，则为一种低度恶变的过程，即所谓疣状癌。
五、醋酸白试验用3-5%醋酸外涂疣体2-5分钟，病灶部位变白稍隆起，肛门病损可能需要15分钟。本试验的原理是蛋白质与酸凝固变白的结果，HPV感染细胞产生的角蛋白与正常的未感染上皮细胞产生的不同，只有前者才能被醋酸脱色。
醋酸白试验检测HPV的敏感性很高，它比常规检测观察组织学变化还好。但偶尔在上皮增厚或外伤擦破病例中出现假阳性、假阳性变白迹象显得界限不清和不规则。美国CDC提示，醋酸白试验并不是特异试验，且假阳性较常见。
尖锐湿疣准确检测方法
若患者生殖器或者是肛周等比较潮湿的部位发觉了表面粗糙的丘疹，常见的有乳头状的、菜花状和鸡冠状的肉质赘生物。那么就要想到尖锐湿疣了，因为这些都是尖锐湿疣的典型病症，出现该中现象要及时去医院诊断。在日常生活中尖锐湿疣怎么判断呢?
如果怀疑自己患了尖锐湿疣，可以做一个醋酸白试验，若试验结果呈阳性、并且活体检也会看到类似的糜烂的图样。试验结果是中间呈现鲜红色并且慢慢向褐色转化，而四周的颜色在逐渐变浅，则说明的确是染上了尖锐湿疣。
尖锐湿疣诊断中，PCR检测时，会看到有特异性HPV-DNA扩增区带，并且，核酸杂交试验过程中也可检出HPV-DNA一样序列。
尖锐湿疣疾病HPV是不溶于血液的，不过却能通过检测血液中的血清抗体来诊断，是否患尖锐湿疣。平常要先经过病毒检测系统来快速的化验一下血清，然后看检测出的病毒抗体、病毒类型还有病毒的数量来诊断。
自我检查尿道内尖锐湿疣的方法
男性好发于、龟头、包皮系带、腹股沟、肛门和直肠等处。而阴茎疣通常发生于外伤的皮肤表面，尿道内也可发生尖锐湿疣，但多见于尿道口，偶可发生于膀胱内，尤其包皮过长的病人更易患病。
多发生于青年人。病程进展缓慢，病人多在无意中发现生殖器处长一无痛性疣状物，其潜伏期平均为3个月。
尖锐湿疣患者皮损初期为小的淡红色丘疹，后逐渐长大，表面呈凹凸不平的柔软乳头样病变，有的呈菜花状，根部可有蒂，表面湿润呈污灰色，时间较久者表面可有糜烂渗液，时有痒感而搔抓，可继发细菌性感染，表面出现脓性分泌物，有臭味和疼痛。
尖锐湿疣诊断主要依据接触传染病史、尖锐湿疣发病部位、临床表现、临床试验及实验室有关检查来确定。对大多数病例，根据尖锐湿疣的发病部位及典型临床特征则不难作出诊断。对少数病例需要进一步临床试验和实验室检查来确诊。
得了尖锐性湿疹如何治疗
女性尖锐湿疣有哪些特点?
一、女性尖锐湿疣诊断比较困难。女性得了尖锐湿疣后，临床症状不明显或缺乏特异性是女性尖锐湿疣诊断较困难的原因之一。例如在女性中不同的性病均可表现为阴道分泌物或白带增多，临床上难以鉴别为何种疾病。其次，女性尖锐湿疣的临床检查亦较男性困难，男性的外生殖器易暴露，直接检查即可。而对女性则需借助扩阴器做内检，才能观察到阴道和宫颈的病变。发生在阴道或宫颈的尖锐湿疣，如果病变小或部位隐匿，易漏诊。
二 、女性尖锐湿疣出现并发症的危险性高。女性尖锐湿疣主要发生于性活跃的育龄期妇女，与性活动和妊娠密切相关，可多种疾病并存。宫颈是易受到多种性传播疾病病原体侵犯的部位，宫颈的感染若治疗不及时或治疗不当，病原体可上行感染，引起各种并发症和后遗症，4.7%～10.2%的宫颈尖锐湿疣可衍变成癌。所以对女性尖锐湿疣的治疗应及时、正规，用药要足量。
三、女性尖锐湿疣易出现生殖并发症。妇女在妊娠时若发生性传播疾病，不仅影响孕妇的健康，也影响胎儿和新生儿的健康。患生殖器疱疹的孕妇，发生低出生体重儿或早产的比例为10%～35%。因此，患尖锐湿疣的妇女应在正规治疗后随访8个月，治好后才能要孩子。
四、女性尖锐湿疣临床症状不明显。由于生理解剖及生殖生理上的差异，一半的病人可不出现任何症状，有的表现为白带增多，颜色发黄，但患者不一定意识到为异常。相比男性尖锐湿疣，发生在男性外生殖器部位的疣体非常容易被看到，而女性可发生在宫颈黏膜，表现为宫颈糜烂、有黏液脓性分泌物，但外阴无皮疹，可无明显临床症状。所以在治疗过程中，我们常常看到，男性只身前来，称其伴侣无任何症状，不需要检查，而实却往往证明其伴侣同样患上了尖锐湿疣。
五、女性尖锐湿疣隐蔽性比男性强，因为尖锐湿疣好发于大小阴唇、阴蒂、阴道和子宫颈，至少20%女性患者的会阴和肛周皮肤易被波及，偶然发生于腋下、腹股沟、乳房下间隙部位及口腔内等。患者多数有外阴瘙痒、白带增多等症状。损害表现为乳头状、鸡冠状或融合成菜花状，大小不等，部分融合成片或有斑块状表现。
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尖锐湿疣潜伏期的特征?
1、尖锐湿疣潜伏期从HPV感染人皮肤粘膜后到尖锐湿疣损害出现需要一段时间，将这段时间称为尖锐湿疣潜伏期。
2、尖锐湿疣潜伏期的长短因人而异，有些人的潜伏期短，有些人的潜伏期则较长。据调查尖锐湿疣的潜伏期为3周到8个月，平均2.8个月。
3、大多数临床观察报道尖锐湿疣潜伏期一般为3个月左右，潜伏期短者3—4周，潜伏期长者8—12个月左右。
4、有学者认为产期感染HPV的婴儿到2岁都不可能有外生殖器疣的表现，但有57%的患儿在2岁时诊断为喉乳头瘤。曾有1例男性尖锐湿疣患者之女性性伴在与其性交后2周阴道口长出尖锐湿疣损害，作者病例中的另一例男性患者是在与女性尖锐湿疣患者性交接触1年半后才发病。
当我们在生活中患有上面的症状时，我们就要去医院检查，确定是尖锐湿疣的时候，我们就要配合医生去治疗这种疾病。大家一定要对这种疾病引起重视。患有它的时候就要去医院里治疗的。
尖锐湿疣诊断
诊断尖锐湿疣症状需要做哪些检查，尖锐湿疣的症状表现不明显的时候，就需要通过一些检查方法来对其进行诊断，但是如果有典型的症状表现的时候，也就不需要这些检查方法。但是，典型的症状不是每次每种情况下的尖锐湿疣发生以后都会出现的，所以，大家务必要了解一下，诊断尖锐湿疣的这些检查方法，了解清楚以后，对尖锐湿疣进行正确的诊断，不能够对尖锐湿疣的诊断出任何的差错。
诊断尖锐湿疣需要做得检查有细胞学检查，这种检查方法是取阴道，子宫颈等部位的湿疣组织做成涂片，在涂片中就能够见到两种细胞，一种细胞核的四周就会出现晕环，而这个晕环占据了大部分的细胞浆，还将细胞浆压缩到边沿，呈现出浓缩状，这种细胞就叫做空泡化细胞;另一种细胞就是单个或者是成对的分布，细胞浆是橙红色到淡黄色，细胞核小但是比较密，佳作角化不良细胞。
再就是通过组织病理变化来诊断尖锐湿疣，这种方法主要就是角化不全，棘层比较的肥厚，乳头瘤一样的增生，粒层以及棘层上部细胞都有比较明显的空泡形成。最后就是通过组织化学检查来诊断尖锐湿疣，这种方法是取少量的病损组织制成涂片，用提异性的抗人类乳头瘤病毒的抗体做染色。对尖锐湿疣进行正确的诊断，然后选择适合的治疗方法对其进行治疗。
尖锐湿疣能诊断吗
尖锐湿疣诊断——醋酸白试验
用3-5%醋酸外涂疣体2-5分钟，病灶部位变白稍隆起，肛门病损可能需要15分钟。本试验的原理是蛋白质与酸凝固变白的结果，hpv感染细胞产生的角蛋白与正常的未感染上皮细胞产生的不同，只有前者才能被醋酸脱色。醋酸白试验检测hpv的敏感性很高，它比常规检测观察组织学变化还好。但偶尔在上皮增厚或外伤擦破病例中出现假阳性、假阳性变白迹象显得界限不清和不规则。美国cdc提示，醋酸白试验并不是特异试验，且假阳性较常见。
尖锐湿疣诊断——免疫组织学检查
常用过氧化物酶抗过氧化物酶方法(即pap)，显示湿疣内的病毒蛋白，以证明疣损害中有病毒抗原。hpv蛋白阳性时，尖锐湿疣的浅表上皮细胞内可出现淡红色的弱阳性反应。
尖锐湿疣诊断——组织化学检查
取少量病损组织制成涂片，用特异抗人类乳头瘤病毒的抗体作染色。如病损中有病毒抗原，则抗原抗体结合。在过氧化物酶抗过氧化物酶(pap)方法中，核可被染成红色。此法特异性强且较迅速，对诊断有帮助。
尖锐湿疣诊断——病理检查
主要为角化不全，棘层高度肥厚，乳头瘤样增生，表皮突增厚，延长，其增生程度可似假性上皮瘤样。刺细胞和基底细胞并有相当数量的核分裂、颇似癌变。但细胞排列规则，且增生上皮和真皮之间界限清楚。其特点为粒层和刺层上部细胞有明显的空泡形成。此种空泡细胞较正常大，胞浆着色淡、中央有大而圆，深嗜碱性的核。通常真皮水肿、毛细血管扩张以及周围较致密的慢性炎性浸润。bushke-loewenstein巨大型尖锐湿疣，表皮极度向下生长，代替了其下面的组织、易与鳞状细胞相混，故须多次活检。若有缓慢发展之倾向，则为一种低度恶变的过程，即所谓疣状癌。
尖锐湿疣诊断——基因诊断
迄今，hpv难于用传统的病毒培养及血清学技术检测，主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的pcr方法具有特异、敏感、简便、快速等优点，为hpv检测开辟了新途径。
女性假性湿疣是什么
一、什么是假性湿疣
假性尖锐湿疣，既是假性湿疣，诊断时宜慎重。此病为一良性乳头瘤病，不属于性传播疾病，无传染性，在20～30 岁妇女的小阴唇内侧见多数1-2 mm光滑丘疹，群集但不互相融合，似鱼子状或小息肉状，有时痒，可能由于生理变异或阴道白色念珠菌致使白带增多刺激所致。
二、症状特征
假性尖锐湿疣是一种至今发病原因不明的疾病，其临床特点和组织病理与尖锐湿疣极易混淆。因此，临床上甚易误诊。
①色泽：假性尖锐湿疣外观呈淡红色(粘膜色)67例，淡褐色13例。
②大小：假性尖锐湿疣直径1～2mm。
③行态：假性尖锐湿疣鱼子状66例，绒毛状7例，息肉状2例，丘疹状3例，苔藓状1例，丝状1例。
④部位：假性尖锐湿疣两小阴唇内侧46例，阴道前庭32例，单侧小阴唇2例。
三、病发特点
女性假性尖锐湿疣(绒毛状小阴唇)的病因可能是生理性异常，也可能与其他感染有关，如念珠菌感染、泌尿系感染，与长期阴道分泌物刺激有关。假性尖锐湿疣主要症状是外阴瘙痒，白带多，皮肤损害限于小阴唇，为粟粒大小，粘膜色或淡红色小丘疹，表面光滑如鱼子状，群集分布，好发在20～30岁的女性外阴，特别是小阴唇内测和阴道前庭。
假性尖锐湿疣部分发生绒毛状改变。醋酸白试验阴性，甲苯胺蓝试验阴性。42例组织病理示粘膜上皮大片空泡样细胞，但此细胞大小.形态.细胞极性及染色均正常，胞浆空泡圆而规则，而无诊断性空泡细胞可见。行PCR检测20例人乳头瘤病毒阴性。说明假性尖锐湿疣与人类乳头状瘤病毒无关。
治疗此病时主要应治疗其他感染，若有念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎或泌尿系感染要首先予以治疗，应加强预防，避免感染这类疾病。若没有感染，就不会有外阴瘙痒的症状，女性假性尖锐湿疣的皮损就会逐渐减少。因而对女性假性尖锐湿疣皮肤损害从医疗的角度来讲，不需要特殊治疗。
尖锐湿疣诊断方法
1尖锐湿疣的检查办法是有很多的，首先是可以进行醋酸白实验，是要使用百分之三到百分之五的醋酸液局部外涂或者是湿敷五到十分钟的，是会在被感染的区域发白的，这个就是所谓的醋酸白现象，不过这种检查的办法特异性是不高的，有些慢性的炎症，还有生殖器官部位的外伤等都会出现假阳性的。
2也可以进行细胞学检查的，是要用阴道或者是宫颈疣组织涂片，巴氏染色，是能够见到两种细胞，就是空泡化细胞还有角化不良细胞同时存在的，对尖锐湿疣是有很大的诊断价值，还可以进行组织病理检查的，如果是在棘层上方还有颗粒层出现空泡化细胞，也是诊断尖锐湿疣感染的重要证据。
3不单单是这样，尖锐湿疣还可以进行渐免疫学试验的，是要采用抗HPV蛋白的抗体检测病变组织中的HPV抗原的，不过这种方法敏感度是不怎么高的，检出的几率只有百分之五十左右的，还有核酸杂交试验，是检测尖锐湿疣的重要手段，包括斑点印迹法、组织原位杂交法、核酸印记法还有聚合酶链反应等检测方法。
尖锐湿疣要如何进行诊断
1、首先来了解一下尖锐湿疣的临床表现：在检查过程中要仔细观察损害分布、形态、大小、颜色、表面情况等。尖锐湿疣特征性损害是典型的菜花型损害，颜色鲜红、淡红或少数呈污灰色，病变组织脆、擦拭后容易出血，即使是非特征性损害其损害表面多呈疣状外观、不光滑或呈颗粒状突起等。
2、得了尖锐湿疣可以通过临床试验来进行诊断。目前临床试验多用醋酸试验，醋酸试验阳性对尖锐湿疣诊断有较为重要的意义。①临床描述：感染的特点为在内外生殖器、会阴或肛门周围出现可见的外生(高起)的增生物。②实验室诊断标准：活检或脱落细胞标本中有hpv感染的组织病理学变化特点;或在损害活检中用抗原或核酸检测显示有病毒。③确诊病例：临床上符合且经实验室检查证实的病例。
3、尖锐湿疣是否有接触感染的病史，这个一定要查清楚。重点要了解其性伙伴有无尖锐湿疣及有无其他性病以及性活动方式，如有否口交、肛交等。尖锐湿疣患者多有异常或非婚姻性生活史或有与尖锐湿疣患者、hpv感染者性接触或共用毛巾、衣物、盆等物品的病史。
4、尖锐湿疣的发病率很高，男女都可发病，而且发病部位是男女性外生殖器以及肛门部位。除这些部位外，一些特殊的部位如口腔、咽喉部等部位的尖锐湿疣病变在特殊人群中应注意。在检查尖锐湿疣发病部位过程中，不要只检查患者所述病变部位，而且要对患者进行较全面的检查，如在检查外阴部位的同时应检查肛门部位，在检查肛门部位的同时也应检查外阴部位，以及对有特殊性活动方式者进行口腔、咽喉等部位的检查。
怎样判断是颗粒珍珠状疱疹还是尖锐湿疣
阴茎颗粒状疱疹，见于男性龟头边缘，为同肤色的，均匀一致的排列整齐的小米粒大小的丘疹，无炎症反应，无任何自觉不适感，此为颗粒珍珠状疱疹，如做醋酸白试验为阴性，也就是5%的醋酸液涂抹后不发白。这种情况见于青春发育后的男性，是完全正常的现象，不需治疗，不必恐慌，但也有个别地方将此种现象误认为湿疣，又做激光又服药是不对的.
典型尖锐湿疣诊断不困难，发现阴部外生殖器、肛周、会阴及阴道等部位的赘生物或小疣体就应当怀疑为尖锐湿疣，如果疣体是单发或多发小丘疹状，乳头状、菜花状或鸡冠花状，表面粗糙，根部有蒂或融合成片，基本就可以认定为尖锐湿疣。非典型皮损，需结合醋酸白试验。即用纱布或棉棒浸蘸5%冰醋酸溶液(即食用白醋)紧敷患处，2～5分钟后观察：如为尖锐湿疣，则局部变为白色，此为阳性反应;假性湿疣则为阴性反应，即不变色。如果局部有炎症时，可为假阳性反应，必要时可做病理检查。跟尖锐湿疣比较相象容易混淆的常见疾病分别是男性的阴茎颗粒珍珠状疱疹和女性的假性湿疣。