细胞培养支原体感染

细胞培养支原体感染

细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。

支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如 -内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。InvivoGen公司研究开发的新一代支原体抗生素M-Plasmocin能有效地杀灭支原体，不影响细胞本身的代谢，并且用M-Plasmocin处理过的培养细胞，不会重新感染支原体。

尿道炎的检查项目有哪些

检查项目：尿常规、肾功能检查、血常规

尿常规检查见白细胞计数增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿，尿三杯试验检查，可以发现第1杯内有大量脓细胞，红细胞存在，而第2杯，第3杯基本正常，初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿，尿道或阴道分泌物涂片检查，淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌，非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长，分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体，衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做 PCR检查。

慢性尿道炎需行尿道膀胱镜检查，以明确发病的原因，有时可用金属尿道探子试探尿道内有无狭窄，必要时行尿道造影，急性期尿道内忌用器械检查。

得了尿道炎的患者需要做哪些检查

1、尿常规检查见白细胞增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿，尿三杯试验检查，可以发现第1杯内有大量脓细胞，红细胞存在，而第2杯，第3杯基本正常，初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿，尿道或阴道分泌物涂片检查，淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌。

非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长，分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体，衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做PCR检查。

2、慢性尿道炎需行尿道膀胱镜检查，以明确发病的原因，有时可用金属尿道探子试探尿道内有无狭窄，必要时行尿道造影，急性期尿道内忌用器械检查。

如何正确检查尿道炎

尿道炎是由尿路感染而引发的泌尿系统疾病，常有的主要是支原体和衣原体感染，它主要分为急性尿道炎和慢性尿道炎。总之，尿道炎是因尿道内感染而导致发炎一种病症。

尿道炎不仅仅让患者在生活中频繁遭遇尴尬并痛苦不堪，比如尿急、尿频、尿痛、滴白、血尿、红肿、尿道刺痛、精神萎靡不振，严重者合并寒战高热。其潜在的危害也是巨大的。

如何正确检查尿道炎呢?

1、尿常规检查：见白细胞增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿。

2、尿三杯试验检查：可以发现第1杯内有大量脓细胞、红细胞存在，而第2杯、第3杯基本正常。初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿。

3、尿道或阴道分泌物涂片检查：淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌，非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长。分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体、衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做PCR检查。

在日常生活中，若遇到尿液颜色明显变化的情况，不必过于紧张，也不可不提高警惕。可参照以下所述，根据尿液颜色，结合自身用药、饮食等情况进行分析判断，并到医院进行尿常规检查，很快就可查明原因并及时得到正确的治疗。

尿道炎的检查

尿常规检查见白细胞计数增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿，尿三杯试验检查，可以发现第1杯内有大量脓细胞，红细胞存在，而第2杯，第3杯基本正常，初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿，尿道或阴道分泌物涂片检查，淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌，非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长，分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体，衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做PCR检查。

慢性尿道炎需行尿道膀胱镜检查，以明确发病的原因，有时可用金属尿道探子试探尿道内有无狭窄，必要时行尿道造影，急性期尿道内忌用器械检查。

尿道炎的检查

1、尿常规检查见白细胞增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿，尿三杯试验检查，可以发现第1杯内有大量脓细胞，红细胞存在，而第2杯，第3杯基本正常，初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿，尿道或阴道分泌物涂片检查。

淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌，非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长，分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体，衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做PCR检查。

2、慢性尿道炎需行尿道膀胱镜检查，以明确发病的原因，有时可用金属尿道探子试探尿道内有无狭窄，必要时行尿道造影，急性期尿道内忌用器械检查。

男性支原体衣原体检查方法

随着现代生活的影响，非淋菌性尿道炎和淋病的检出率逐年上升，而对于非淋菌性尿道炎多是做支原体衣原体的检测。可以对于有淋病感染的患者，由于淋病的症状较重，常常掩盖了有支原体衣原体感染的症状，致使临床治疗容易反复和增加治愈难度。故此，对于有淋病感染的患者，也是有必要做支原体衣原体检查的。

男性支原体衣原体检查方法如下：

1、血常规：周围血白细胞计数一般正常嗜酸性粒细胞增多。

2、x线检查：衣原体肺炎胸片无特异性多为单侧下叶浸润表现为节段性肺炎严重者呈广泛双侧肺炎沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润过度充气征比较常见偶见大叶实变。

3、直接涂片镜检：取咽分泌物痰呼吸道教膜或其他部位标本做涂片进行GZmesa染色原体染成红色始体染成深蓝色沙眼衣原体包涵体因含有糖原801染色染成褐色。

4、快速抗原检测：多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体还可应用法加入抗衣原体抗体酶标抗体18G及底物进行比色定量检测这两种方法简便敏感。

5、衣原体分离肺炎衣原体培养最好用Hela细胞或Hep一2细胞一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本及时接种目前衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep一2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA)该技术敏感性高特异性强如能早期采集标本可在48h内获得阳性结果

检查支原体感染有何方法

诊断支原体感染和诊断衣原体感染一样必需 经过实验室检查，不能仅仅根据症状就作出诊断。目前诊断支原体感染用的是培养法和血清学 检测法。(1) 支原体培养：标本的取材男性为尿道内 口约0.5cm以上，女性提倡子宫颈棉拭子取材， 而不用尿培养。支原体的培养和鉴定是确诊支原 体感染的唯一方法。每种培养基都用酚红作标 记，人型支原体和腺原体可使培养基变成粉红 色。(2) 支原体血清学鉴定：1984年开始使用 一种微量的酶标免疫法，能检测支原体的8种血 清型抗体。这对于诊断患者为哪一种支原体血清 型感染是很有帮助的。但临床上，不必都作支原 体血清型鉴定，通过支原体培养证明有支原体感 染，马上积极治疗是非常必要的。

支原体感染的诊断检查

·第一，支原体感染的检查怎么做?

1.血常规：周围血白细胞计数一般正常，嗜酸性粒细胞增多。

2.快速抗原检测：多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体，还可应用2I—IsA法加入抗衣原体抗体、酶标抗体18G及底物进行比色定量检测。这两种方法简便敏感。

3.直接涂片镜检：取咽分泌物、痰、呼吸道教膜或其他部位标本做涂片，进行GZmesa染色，原体染成红色，始体染成深蓝色。沙眼衣原体包涵体因含有糖原。801染色染成褐色。

4.X线检查：衣原体肺炎胸片无特异性，多为单侧下叶浸润，表现为节段性肺炎，严重者呈广泛双侧肺炎。沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润，过度充气征比较常见，偶见大叶实变。

5.衣原体分离：肺炎衣原体培养最好用Hela细胞或Hep-2细胞，一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本，及时接种。衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep-2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法MFA，该技术敏感性高，特异性强，如能早期采集标本，可在四十八小时内获得阳性结果。

6.血清学检查：采用补体结合试验，在恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高四倍或以上，即有诊断意义，但无早期诊断意义。微量免疫荧光法MrF适用于沙眼衣原体。

7.PCR技术：普通PCR技术检测肺炎衣原体特异性DNA，具有快速、简便、特异的优点，敏感性高于细胞分离技术，用套式PCRnPCR检测可显著提高其敏感性。

·第二：支原体感染的诊断标准有哪些?

支原体感染的诊断标准包括第一是对抗体及抗原进行检测。肺炎支原体感染后2周，约50%产生抗体，红细胞冷凝集试验阳性，效价1∶32以上，恢复期效价4倍增长则意义大。40%～50%病例链球菌MG凝集试验阳性。另可通过补体结合试验、间接血凝、酶联吸附等检测。此外，病灶灌洗液通过PCR检测。此外，利用基因探针快速检测系统，应用同位素标记DNA，可测 定肺炎支原体中的RNA，与培养相比，符合率达89%。

支原体感染的诊断标准第二是需要检测培养与生化反应。支原体兼性厌氧，在5s%～10%CO2、80%～90%湿度的条件下，生长较好，支原体细胞中的主要成分胆固醇及蛋白质均来自培养基，后者需含血清、卵黄等。菌落形似煎荷包蛋，一般为大菌落，100～300nm，生长需7～14d，另一种，菌落10～25nm，生长快，只需24～48h，称为T株，即脲解支原体。

支原体感染这种疾病不仅不能够掉以轻心，而且需要提高我们对该种疾病的警惕意识，很多时候，都是因为疏忽大意对小病的不注意引发了大疾病的隐患。专业医生提醒我们，及早发现及早治疗是提高疾病治愈率的关键。

尿道炎的检查

1、尿常规检查：检查可见白细胞增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿。

2、尿三杯试验检查：可以发现第1杯内有大量脓细胞、红细胞存在，而第2杯、第3杯基本正常。初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿。

3、尿道或阴道分泌物涂片检查：淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌，非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长。分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体、衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做PCR检查。

4、慢性尿道炎需行尿道膀胱镜检查，以明确发病的原因。有时可用金属尿道探子试探尿道内有无狭窄，必要时行尿道造影。

尿道炎的检查项目有哪些

尿常规检查见白细胞计数增多或呈脓尿，伴有红细胞增多，少数呈肉眼血尿，尿三杯试验检查，可以发现第1杯内有大量脓细胞，红细胞存在，而第2杯，第3杯基本正常，初段尿细胞培养菌数明显多于中段尿，尿道或阴道分泌物涂片检查，淋菌性尿道炎可见细胞内或细胞外淋病双球菌，非特异性尿道炎可用分泌物或前尿道拭子培养，见大量细菌生长，分泌物涂片及培养均未发现细菌者，即有支原体，衣原体感染的可能，可行特殊方法培养或做 PCR检查。

慢性尿道炎需行尿道膀胱镜检查，以明确发病的原因，有时可用金属尿道探子试探尿道内有无狭窄，必要时行尿道造影，急性期尿道内忌用器械检查。

请问唾液会传染支原体吗

支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。

支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素完全不敏感。支原体有时被称为类菌质体。无细胞壁，多呈不规则球状、长丝状，可分枝，营寄生共生或腐生。一般侵害对象为动植物，可造成多种疾病。

支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰氏染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长。用培养基培养，营养要求比细菌高。由于它没有细胞壁，因此对影响细胞壁合成的抗生素，可抑制或影响支原体的蛋白质合成，有杀伤支原体作用，支原体对热抵抗力差，通常55℃经15分钟处理可使之灭活。

支原体其中的肺炎支原体是可以通过唾液传播的，另外一个比较常见的解脲支原体一般都是通过两性生活传播的，所以一定要对自己的健康和安全做好防护措施，不过有的支原体在人体内本身就有，有的医生检查的时候就说患者患有了某些疾病，这样的说法都是不准确的。

支原体感染的常规检查方法具体有哪些

1、血常规检查支原体感染：周围血白细胞计数一般正常，嗜酸性粒细胞增多。

2、快速抗原检测支原体感染：多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体，还可应用2I—IsA法加入抗衣原体抗体、酶标抗体18G及底物进行比色定量检测。这两种方法简便敏感。

3、血清学检查支原体感染：采用补体结合试验检查支原体感染，着恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高4倍或4倍以上，即有诊断意义，但无早期诊断意义。微量免疫荧光法(MrF)适用于沙眼衣原体。

4、x线检查支原体感染：衣原体肺炎胸片无特异性，多为单侧下叶浸润，表现为节段性肺炎，严重者呈广泛双侧肺炎。沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润，过度充气征比较常见，偶见大叶实变。

5、直接涂片镜检检查支原体感染：取咽分泌物、痰、呼吸道教膜或其他部位标本做涂片，进行GZmesa染色，原体染成红色，始体染成深蓝色。沙眼衣原体包涵体因含有糖原。801染色染成褐色。

6、PCR技术检查支原体感染：普通PcR技术检测肺炎衣原体特异性DNA，具有快速、简便、特异的优点，敏感性高于细胞分离技术，但在检测咽拭于标本中效果不够理想。用套式PcR(nPcR)检测支原体感染可显著提高其敏感性。

7、衣原体分离检查支原体感染：肺炎衣原体培养最好用Hela细胞或Hep一2细胞，一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本，及时接种。衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep一2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA)，该技术检查支原体感染敏感性高，特异性强，如能早期采集标本，可在48h内获得阳性结果。

支原体感染的鉴别诊断有什么

支原体感染的鉴别诊断有什么?在支原体感染患者中，有年轻的，有年老的，所以支原体感染的发生是很多见的，但是有很多人都不知道自己会有支原体感染的发生，所以很多时候对于支原体感染病情做好鉴别诊断是特别重要的，下面我们就看下支原体感染的鉴别诊断吧。

一培养与生化反应：支原体兼性厌氧，在5%～10%CO2，80%～90%湿度的条件下，生长较好，支原体细胞中的主要成分胆固醇及蛋白质均来自培养基，后者需含血清，卵黄等，菌落形似煎荷包蛋，一般为大菌落，100～300nm，生长需7～14d，另一种，菌落10～25nm，生长快，只需24～48h，称为T株，即脲解 支原体。

二抗体及抗原检测：肺炎支原体感染后2周，约50%产生抗体，红细胞冷凝集试验阳性，效价1∶32以上，恢复期效价4倍增长则意义大，40%～50%病例链球菌MG凝集试验 阳性，另可通过补体结合试验，间接血凝，酶联吸附等检测，此外，病灶灌洗液通过PCR检测，此外，利用基因探针快速检测系统，应用同位素标记DNA，可测 定肺炎支原体中的RNA，与培养相比，符合率达89%。

另外提醒广大支原体感染患者：根据自身支原体感染自己的病症，根据自己的情况做好即时性的治疗，另外如果想控制好自己的支原体感染疾病，希望支原体感染患者要做好治疗，注意自身的饮食规划，做好支原体感染的治疗。