凝血酶的生产
凝血酶的生产
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凝血酶原时间偏低偏高的原因
凝血酶原时间是一个有争议的区间范围，有一些人认为正常的情况应该是12到14秒，还有的人认为可能是11到16秒。虽然说这种时间存在争议，但是如果检查的时候发现凝血酶原时间严重偏低，则也可能说明某些身体方面的疾病或者是问题。其实凝血酶原时间在很大程度上还反映的血浆凝固需要的时间。
通过凝血酶原时间可以对慢性病毒性肝炎严重程度进行评估，还可以对肝硬化代偿期以及重型肝炎进行病情程度评估。如果肝硬化病人处于代偿期，但是凝血酶原时间过度偏低，则有可能发生食道静脉曲张的概率非常大，并且还有可能出现预见性的高危出血情况。
其实凝血酶原时间只是一个参考值，正常参考值凝血酶原时间11～13秒，也有的说11～15秒或者12-16秒。凝血酶原时间检查最为常见的情况是进行抗凝治疗的过程当中，这个时候应当密切观察凝血酶原时间。
如果凝血酶原时间偏低，则原因非常多，比如可能是乙肝或者是肝硬化导致，还有可能是脂肪肝引起。某些血栓性疾病也是有可能使得凝血酶原时间偏低的。如果凝血酶原时间偏高，则很有可能是生气凝血因子大量缺水，比如有的人肝功能异常，这样就会使得凝血因子生成减少，从而导致凝血酶原时间偏高。凝血酶原时间不管偏高还是偏低都预示着身体出现了某些方面的病变，这个时候应当进一步检查治疗。
尿毒症患者贫血的原因是什么
(1)血小板功能障碍：尿毒症患者血中某些毒性物质的蓄积，使血小板第Ⅲ因子含量及活性降低，释放障碍，有效性降低，凝血酶原消耗及凝血活酶生成不佳，血小板粘附性及凝聚性降低。
(2)部分凝血因子的改变：尿毒症时凝血酶原时间可轻度延长，这种延长可能由于尿毒症毒性物质抑制了因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ等的活力。同时，长期应用抗生素造成肠道灭菌综合征，使维生素K的吸收及合成障碍。这些因素也是造成出血倾向的部分原因。
(3)纤溶活力降低：尿毒症时，由于尿激酶抑制剂显著增加或由于血浆素原活化素的显著减少，所以纤溶活力降低，纤维蛋白原增高引起各脏器纤维蛋白沉着。沉着在肾脏局部的纤维蛋白可降解产生大量的纤维蛋白降解产物(FDP)。FDP的大分子碎片具有强烈的抗凝血酶作用，抑制血小板功能，干扰凝血活酶的形成;FDP的小分子碎片可以抑制纤维蛋白单体聚合，妨碍凝血块的形成。因而FDP的出现加重尿毒症的出血倾向。
砍了本文的介绍我们知道血小板功能障碍、部分凝血因子的改变以及纤溶活力降低是导致尿毒症患者贫血的的主要原因，要提醒广大患者的是，贫血程度有大也有小，对于尿毒症贫血患者来说也是如此，所以在出现贫血后一定要及时咨询医生。
凝血酶的用法
1、局部止血 用灭菌氯化钠注射液溶解成50～200单位/ml的溶液喷雾或用本品干粉喷洒于创面。
2、消化道止血 用生理盐水或温开水(不超37℃)溶解成10～100 单位/ml的溶液，口服或局部灌注，也可根据出血部位及程度增减浓度、次数。
凝血酶时间偏高的原因
凝血酶时间偏高的原因
凝血酶原时间正常范围为：男性11～13.7s，女性11-14.3s。
造成凝血酶原时间偏高，凝血酶原时间延长的因素较多，但其根本原因是凝血因子的缺失。一切导致凝血因子减少的原因都可能导致凝血酶原时间延长。凝血酶原之所以是肝功能检查中重要的一项，那么其时间的长短一定反应肝功能的某些变化。
肝脏是凝血因子形成的主要场所，当肝功受损时凝血因子不能正常合成，导致凝血酶原时间偏高延长。凝血酶原时间高于正常值时会表现一系列的症状，如体表容易出血，出血后不容易止血。如牙龈出血、创伤出血等现象。同时凝血酶原时间较长的情况下身体容易出现青紫斑块，身体稍微受压就会产生或青或紫的斑，几分钟后才渐渐消失。
除肝功能异常造成凝血酶原偏高现象还有先天性凝血因子缺乏、继发性/原发性纤维蛋白溶解功能亢进等原因。当凝血酶原时间延长时首先要考虑肝功问题，做详细的肝功检查，确定病因及时进行治疗。
上面就是对凝血酶时间偏高的原因的介绍，通过了解之后希望对朋友们能够带来一定的帮助，平时在生活中尽量要保持良好的生活习惯，平时饮食上也要注意营养的均衡，平时多吃些不同的食物，在身体出现不适的时候就要及时咨询医生。
血友病甲的临床诊断与治疗
临床诊断
理论推断
根据病史、出血症状和家族史，即可考虑为血友病，进一步确诊须作有关实验室检查。
实验室检查
血友病甲验室检查的特点是：
①凝血时间延长(轻型者正常);
②凝血酶原消耗不良;
③活化部分凝血活酶时间延长;
④凝血活酶生成试验异常。
基因诊断
利用分子生物学技术，发现血友病患者基因突变位点和形式，并可于产前进行胎儿基因诊断。
治疗
预防出血
自由养成安静生活习惯，以减少和避免外伤出血，尽可能避免肌肉注射。
局部止血
表面创伤、鼻或口腔出血可局部压迫止血，或用纤维蛋白泡沫、明胶海绵沾组织凝血活酶或凝血酶敷于伤口处。早期关节出血者，宜卧床休息，并用夹板固定肢体，放于功能位置，亦可用局部冷敷，并用弹力绷带缠扎。关节出血停止、肿痛消失时，可作适当体疗，以防止关节畸形。严重关节畸形可用手术矫形治疗。
替代疗法
目的是将患者所缺乏的因子提高到止血水平。使用的制剂有：
因子Ⅷ和因子Ⅸ制剂
冷沉淀物
凝血酶原复合物
输血浆或新鲜全血
约15%血友病甲患者经反复因子Ⅷ 替代治疗后，出现抗因子Ⅷ抗体。这种患者治疗方法是：
①增加因子Ⅷ 剂量达原剂量一倍以上;
②活化因子Ⅶ (Ⅶ a)或活化凝血酶原复合物;
③大剂量丙种蛋白静脉输注;
④免疫抑制剂，如环磷酰胺;
⑤用链球菌蛋白A吸附抗体。
药物治疗
(1)1-脱氧-8-精氨酸加压素(DDAVP)
(2) 性激素
基因治疗
正在进行动物实验和临床前期验证。
血友病如何诊断
1.一般项目
血小板计数正常，束臂试验阴性，出血时间正常，血块回缩正常;凝血酶原时间正常，凝血酶时间正常，纤维蛋白原定量正常;凝血时间延长为本病的特征，但仅在FⅧ：C活性低于1%～2%时才延长，>4%可正常。
2.初筛试验
凝血酶原消耗试验(PCT)、白陶土部分凝血活酶时间(APTT，当Ⅷ、Ⅸ的活性30%时，即可延长，可以检测轻型病例)、简易凝血活酶生成试验(STGT)有助于轻型和重型血友病A、B的诊断。
3.确诊试验
可用APTT、STGT、Biggs凝血活酶生成(BiggsTGT)纠正试验来鉴定血友病类型。如凝血酶原消耗及凝血活酶生成试验不正常时，可做纠正试验。正常血浆经硫酸钡吸附后，尚含有FⅧ、FⅪ;正常血清中含有FⅨ、IXa因子，因此如果患者血浆的部分凝血活酶时间仅被正常硫酸钡吸附血浆纠正时，为FⅧ缺乏症;仅被正常血清纠正时，为FⅨ缺乏症;如二者皆可纠正，则为FⅪ缺乏症。可将三者加以鉴别。
4.FⅧ、FⅨ、IXa因子活性测定
采用凝血酶原时间一期法，将已知有关因子缺乏的血浆作为基质血浆，加入兔脑浸出液、白陶土悬液、氯化钙及不同稀释度血浆或血清后，按凝固时间制成有关因子活性曲线后，对受检标本进行换算。
5.FⅧRAg的测定
血友病A患者血浆中含量正常或增高。
6.FⅧCAg的测定
在血友病A患者中，血浆Ⅷ：CAg与Ⅷ：C平行减少。
7.VWFAg的测定
血友病A患者正常或增高。
8.基因诊断
血友病分子水平存在着显著的遗传异质性，基因诊断血友病是一种有效精确快速的方法，目前主要采用PCR进行基因分析。
9.血友病A携带者及胎儿期的诊断和遗传咨询
大多数血友病A携带者血浆中因子Ⅷ：C的水平仅为正常妇女平均值的50%。近年来，大多数人认为检测Ⅷ：C与ⅧR：Ag的意义较大，70%～98%的携带者比值小于正常。在妊娠第8～12孕周，通过胎儿镜羊膜穿刺或绒毛取样，用放射免疫微量法测定ⅧR：Ag及Ⅷ：C，可在产前诊断胎儿是否患血友病，以便考虑中止妊娠问题。近年来基因诊断技术的开展，目前已应用于对传递者及产前的检查。
凝血功能障碍检查方法
凝血功能障碍的分类
分为遗传性和获得性两大类。
1.遗传性凝血功能障碍一般是单一凝血因子缺乏，多在婴幼儿期即有出血症状，常有家族史。
2.获得性凝血功能障碍较为常见，患者往往有多种凝血因子缺乏，多发生在成年，临床上除出血外尚伴有原发病的症状及体征。
凝血功能障碍的相关检查
1、血浆激肽释放酶原测定
2、乙醇胶试验
3、简易凝血酶生成试验
4、血小板第Ⅲ因子有效性试验
5、血小板活化因子
凝血酶是什么
【主要成分】纯化凝血酶为牛、兔或猪血中提取的凝血酶原，加入凝血活酶及钙激活后，获得的蛋白样无菌冻干品或稀释液。
【药理作用】凝血酶能使纤维蛋白原转化成纤维蛋白。局部应用后作用于病灶表面的血液很快形成稳定的凝血块，用于控制毛细血管、静脉出血，或作为皮肤、组织移植物的黏合、固定剂。pH<5时失效。凝血酶对血液凝固系统的其他作用尚包括诱发血小板聚集及继发释放反应等。
【适应证】本品能有效地用于小血管或毛细血管渗血的局部止血，例如肝素化患者穿刺部位的渗血。与明胶海绵同用于外科止血。
【不良反应】可发生变态反应。外科止血中应用本品曾有致低热反应的报道。
【禁忌证】已知过敏体质或对本品过敏者不得用本品。
【用法用量】外用可直接应用粉剂，也可用溶液。溶液浓度可根据出血严重程度以0.9%生理盐水新鲜配制。溶液应在数小时内应用。常用浓度为50～250单位/ml。整形外科、拔牙、皮肤移植、肝素化患者穿刺部位渗血常采用100单位/ml。凝血酶与明胶海绵同用时要注意去除海绵中的空气，将浸泡饱和的明胶海绵置于出血表面10～15秒，加敷料包扎。本品溶液温水送服治疗消化道出血时必须充分中和胃酸，pH>5方能起效。
【注意事项】①凝血酶严禁注射，不允许进入血管内;②受热或遇酸、碱及重金属盐可使本品活力下降。③本品必须与创面直接接触才能起止血作用。④出现过敏症状时，立即停药。⑤儿童中应用本品的安全性未被证实，妊娠妇女只在具有明确指征，病情必需时才能使用。
凝血酶的测定
纤维蛋白原溶液的制备
取纤维蛋白原约30mg，精密称定，用0.9% 氯化钠溶液1.5ml溶解，加凝血酶0.1ml(约3单位)，快速摇匀,室温放置约1小时至完全凝固，取出凝固物，用水洗至洗出液加硝酸银试液不产生浑浊，在105℃干燥3小时,称取重量,计算纤维蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.9%氯化钠溶液制成含0.2%凝固物的纤维蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0～7.4，再用0.9%氯化钠溶液稀释成含0.1%凝固物的溶液，备用。
标准曲线的制备
取凝血酶标准品，用0.9%氯化钠溶液分别制成每1ml中含5.0单位、6.4单位、8.0单位、10.0单位的标准品溶液。另取内径1cm、长10cm的试管4支,各精密加入纤维蛋白原溶液0.9ml，置37℃±0.5℃水浴中保温5分钟，再分别精密量取上述4种浓度的标准品溶液各0.1ml，迅速加入上述各试管中，立即计时、摇匀，置37℃±0.5℃水浴中，观察纤维蛋白的初凝时间，每种浓度测5次,求平均值(5次测定之最大值与最小值的差不得超过平均值的10%,否则重测)。标准品溶液的浓度应控制凝结时间在14～60秒为宜。在双对数坐标纸上，以每管中标准品实际效价(单位)为横坐标，凝结时间(秒) 为纵坐标，绘制标准曲线。
测定法
取本品3瓶，分别精密称定其内容物的重量,每瓶按标示量分别加0.9%氯化钠溶液制成与标准曲线浓度相当的溶液，精密吸取0.1ml，按标准曲线的制备方法平行测定5次，求出凝结时间的平均值(误差要求同标准曲线)，在标准曲线上或用直线回归方程求得效价(单位)，按下式计算：
式中U为0.1ml供试品在标准曲线上读得的实际效价(单位);
V为每瓶供试品溶解后的体积，ml;
10为0.1ml换算成1.0ml的数值;
W为每瓶供试品的重量，mg。
并计算出每瓶相当于标示量的百分数。
每瓶效价均应符合规定，如有一瓶不符合规定，另取3瓶复试，均应符合规定。
凝血酶的药典标准
来源(名称)、含量(效价)
本品为牛血或猪血中提取的凝血酶原，经激活而得的供口服或局部止血用凝血酶的无菌冻干制品。按无水物计算，每1mg凝血酶的活力不得少于10单位。含凝血酶应为标示量的80%～150%。
制法要求
本品应从检疫合格的牛或猪血中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。
性状
本品为白色或类白色的冻干块状物或粉末。每1ml中含500单位的0.9%氯化钠溶液可微显浑浊。
检查
水分
取本品，照水分测定法(2010年版药典二部附录ⅧM第一法)测定，含水分不得过5.0%。
装量差异
应符合注射剂项下的有关装量差异的规定(2010年版药典二部附录ⅠB)。
无菌
取本品，分别加0.9%无菌氯化钠溶液5ml溶解后，依法检查(2010年版药典二部附录ⅪH)，应符合规定。
效价测定
纤维蛋白原溶液的制备
取纤维蛋白原，加0.9%氯化钠溶液适量溶解，用0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0～7.4，再用0.9%氯化钠溶液稀释成含0.1%凝固物的溶液，备用。
标准品溶液的制备
取凝血酶标准品，加0.9%氯化钠溶液溶解并分别定量稀释制成每1ml中含5.0单位、6.4单位、8.0单位与10.0单位的标准品溶液。
供试品溶液的制备
取本品5瓶，分别加适量0.9%氯化钠溶液溶解，并全量转移至同一量瓶中，用上述溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取适量，用上述氯化钠溶液定量稀释制成每1ml中约含7单位的供试品溶液。
测定法
取内径1cm、长10cm的试管4支，各精密加入纤维蛋白原溶液0.9ml，置37℃±0.5℃水浴中保温5分钟，再分别精密量取上述4种浓度的标准品溶液各0.1ml，迅速加入各试管中，立即计时、摇匀，置37℃±0.5℃水浴中，观察纤维蛋白的初凝时间。每种浓度测5次，求平均值(5次测定之最大值与最小值的差不得超过平均值的10%，否则重测)。标准品溶液的浓度应控制凝结时间在14～60秒为宜。以标准品效价(单位)的对数为横坐标，凝结时间(秒)的对数为纵坐标，进行直线回归。精密量取供试品溶液0.1ml，按上述方法平行测定5次，求出凝结时间的平均值(误差要求同标准曲线)，用直线回归方程求得单位数，计算，即得。
类别
局部止血药。
规格
(1) 200单位 (2) 500单位 (3)1000单位 (4)2000单位 (5)5000单位 (6)10 000单位
贮藏
密封，10℃以下贮存[2] 。
血友病的应急处理措施
血友病(hemophilia)是先天性因子ⅷ、ⅸ、ⅺ缺乏，可分为血友病甲、乙、丙。 血友病甲发病率最高、症状最重，其次为血友病乙，血友病丙发病率低且症状轻。
血友病甲、乙为伴性染色体隐性遗传，血友病丙为常染色体隐性遗传。先天性缺乏因子ⅷ、ⅸ和ⅺ，使内源性凝活酶生成减少，导致凝血障碍。
临床表现
自发或轻微外伤后出现皮下大片瘀血或肌肉深部血肿、局部紫黑，粘膜出血以鼻衄、牙龈出血多见，消化道出血不多见，膀胱、肾、肺及胸膜出血均少见，颅内出血虽不多见，但可危及生命。
关节病变主要表现为肿痛，反复出现引起慢性增生性关节炎，导致关节畸形，丧失功能。
诊断要点
(1)发病多在初学走路的幼儿和学龄儿童。
(2)轻微外伤或小手术后，出血不止，迁延数日、数月，甚至威胁生命。
(3)出血：皮肤大片瘀血或肌肉深部血肿，鼻衄、牙龈等粘膜出血等。
(4)关节病变：急性期以肿痛为主。
(5)实验室检查：
①筛选试验：血小板计数、出血时间及血块退缩时间正常，凝血时间、部分凝血活酶时间及凝血活酶生成时间延长，血清凝血酶原时间缩短。
②定性实验：凝血活酶生成试验及纠正实验，简易凝血活酶生成纠正实验对血友病定型有确诊意义：
能被正常硫酸钡吸附血浆纠正而不能被正常血清纠正的为血友病甲。
不能被正常硫酸钡吸附血浆纠正而能被正常血清纠正的为血友病乙。
均能被正常硫酸钡吸附血浆和正常血清纠正的为血友病丙。
鉴别诊断应与血管性假性血友病鉴别，血管性假性血友病由ⅷr、ag、ⅷr：wf缺如或减低引起，而ⅷ：c活性减低也可能引起，典型血管性假性血友病有家族史，常染色体显性遗传即男、女都可以得病，父母都可遗传。临床主要表现为粘膜、皮下出血，和少数关节、肌肉出血，但一般无关节畸形，出血时间延长或阿斯匹林耐量试验阳性，ⅷ：c、ⅷr：rcof及ⅷr：ag者减低，可助诊断和鉴别诊断。
变异型血管性假性血友病可呈常染色体隐性遗传，父母亲可无临床表现，无遗传史，出血症状较严重，出血时间，ⅷr：rcof一至数项正常，但ⅷr：ag交叉免疫电泳异常，可助鉴别。
应急处理
(1)尽量避免手术或外伤。
(2)局部压迫或冷敷止血，也可贴敷新鲜血浆浸膏。
(3)云南白药、三七粉局部使用可达局部止血作用。
(4)有新鲜血肿或关节积血时，应卧床休息，减少活动。
(5)急性期可口服强的松每日40～60mg，分三次服用;口服避孕药能缓解女性患者月经多。
(6)出血严重或持续不止时，应送往医院输新鲜全血或血浆及其它制品。
血友病的检查
筛选试验：血小板计数、出血时间及血块退缩时间正常，凝血时间、部分凝血活酶时间及凝血活酶生成时间延长，血清凝血酶原时间缩短。
定性实验：凝血活酶生成试验及纠正实验，简易凝血活酶生成纠正实验对血友病定型有确诊意义：能被正常硫酸钡吸附血浆纠正而不能被正常血清纠正的为血友病甲。不能被正常硫酸钡吸附血浆纠正而能被正常血清纠正的为血友病乙。均能被正常硫酸钡吸附血浆和正常血清纠正的为血友病丙。
在临床上还能多的血液疾病和血友病有着相似的症状，大家要加以区别。比如说应与血管性假性血友病鉴别，血管性假性血友病由ⅧR、Ag、ⅧR：WF缺如或减低引起，而Ⅷ：C活性减低也可能引起，典型血管性假性血友病有家族史，常染色体显性遗传即男、女都可以得病，父母都可遗传。临床主要表现为粘膜、皮下出血，和少数关节、肌肉出血，但一般无关节畸形，出血时间延长或阿斯匹林耐量试验阳性，Ⅷ：C、ⅧR：RCOF及ⅧR：Ag者减低，可助诊断和鉴别诊断。
血友病的原因多是遗传所致，变异型血管性假性血友病可呈常染色体隐性遗传，父母亲可无临床表现，无遗传史，出血症状较严重，出血时间，ⅧR：RCOF一至数项正常，但ⅧR：Ag交叉免疫电泳异常，可助鉴别。
血友病以A型较为常见，出血症状是本病的主要表现，对于这种患者，医学上尚无较好的治疗方法，只能以输血为主。