什么是流式细胞分析
什么是流式细胞分析
流式细胞分析(flowcytometer),又称流式细胞术,是以流式细胞仪(flowcytometer)测量悬浮细胞(或微粒)的一种现代细胞分析技术。综合运用了现代多种高新技术在极短的时间内同时分析大量细胞(或微粒)的多种特性与功能,对研究细胞的生理功能、疾病的发生与发展规律等有重要意义,在细胞生物学、血液学、免疫学、肿瘤学等领域有着极其广泛的应用。临床流式细胞分析(clinicalflowcytometer)是将流式细胞分析技术与方法应用于临床医学,密切与临床疾病的诊断、分型、治疗、预后及预防等相结合的最新应用学科。流式细胞分析几乎可对各种组织及细胞进行检测,包括各种细胞的相对计数、绝对计数、细胞膜、细胞质、细胞核中各种抗原分子的定性及定量分析、细胞中DNA和RNA的定量、倍体分析或特异性DNA、RNA序列检查、细胞的某一种到多种生物学特性及功能的同时分析。CD分子是细胞(白细胞、红细胞、血小板及血管内皮细胞等)在分化成为不同谱系、不同阶段细胞以及活化过程中或疾病状态下出现或消失的细胞表面标记,应用流式细胞术,结合抗体标记技术,检测CD分子的表达情况。可以应用于阵发性睡眠性血红蛋白...
膀胱癌常见的检查项目都有哪些
项目一、B型超声波检查:
B超检查是膀胱癌最常用的一种检查方法,经腹部B超检查对于膀胱癌的诊断和鉴别是非常重要的,而且这种检查方法的准确性也是非常高的,因此,临床上多将B型超声波检查用于膀胱癌的初期筛选检查。
项目二、膀胱癌造影:
膀胱癌造影这种检查方法现在在临床上应用的还不多,但是这种检查方法可以有效的补充膀胱镜检查的不足,因而这种检查方法多用于膀胱镜检查的辅助检查,通过这种检查对于膀胱癌的诊断是非常重要的。
项目三、尿液流式细胞术:
尿液流式细胞术可以在极短的时间内迅速的测定出尿液中每个细胞内的RNA和DNA,从而可以更好的诊断膀胱癌,这种检查方法不仅可以用于膀胱癌的诊断,而且对于肿瘤的恶性潜力也会有很大的预估,因此,这种检查方法对于膀胱癌的检查也是非常重要的。
项目四、CT检查:
CT检查主要用于腹部、盆腔等处的检查,这种检查方法可以了解肿瘤累及的范围,还可以检查到肿瘤有无侵犯到周围的直肠、子宫以及阴道等器官,而且对于膀胱癌有无转移也有很好的判断,因此,这也是膀胱癌的一种常见检查方法。
北沙参的功效与作用及禁忌 抗肿瘤
应用流式细胞仪发现北沙参对肿瘤细胞的增殖有抑制作用,抑制率在20%以上。北沙参的浸出液对二氨基芴诱导的鼠伤寒沙门菌组氨酸缺陷型突变株TA98、TAl00的回复突变有抑制作用。
白血细胞偏高的原因
白细胞计数偏高于10.0×10^9/L通常被认为是异常,是被非常关注的问题,这种升高既有生理性因素也有病理性因素,我们可以不必担心生理性因素造成的暂时性升高,但是绝对不能忽视病理性增高。白细胞生理性增高往往有以下情况,如剧烈运动、体力劳动、冷热水浴后、酷热和严寒、紫外线照射、妇女月经期和排卵期、妊娠期(特别是妊娠20周后)、产后、吸烟者、情绪激动、刺激、儿童剧烈哭闹等因素都可导致白细胞数量增高。此外在安静和放松状态下较低、活动和餐后适当增高、下午较上午偏高,一天之内的变化甚至可相差一倍,因此到医院做血常规化验应尽量保持在平静状态下,在相同的时间段内检查,其结果才更具参考价值和可比性。
白细胞计数偏高最严重的问题是造血系统的恶性肿瘤,也就是白血病,其白细胞常会明显升高,其升高幅度可以是正常人的数倍或数十倍以上。此类患者不仅白细胞数量出现明显改变,更重要的是其质量发生重要变化,大量幼稚细胞出现在外周血液中。白血病有许多类型,可分为急性与慢性,此时不仅仅要看白细胞数量,还需要做血涂片甚至骨髓穿刺检查、流式细胞分析和分子生物学检查才能确认。
以上为大家介绍了白血细胞偏高可能引发的疾病。随着年龄的增长,我们的身体会出现这样那样的问题,白血细胞偏高患者不要恐慌,要保持心态平和,积极配合医生的治疗,任何疾病都是有可能被治愈的。
卵巢肿瘤需做的检查项目
实验室检查
1.腹水细胞学检查 下腹髂窝穿刺,如腹水少可经后穹隆穿刺,抽腹水查癌细胞。
2.肿瘤标记物测定
(1)CA125:对诊断卵巢上皮性癌有重要参考价值,特别是浆液性囊腺癌,其次是宫内膜样癌,浆液性囊腺癌的检测阳性率在80%以上,90%以上CA125水平随病情缓解或恶化而消长,因此还可以作为治疗后的监测,晚期卵巢癌阳性率高,但Ⅰ期卵巢恶性肿瘤阳性率仅50%,临床上CA125≥35U/ml为阳性标准,CA125并非特异性,部分妇科非恶性疾病如急性盆腔炎,子宫内膜异位症,盆腹腔结核,卵巢囊肿,子宫肌瘤及一些非妇科疾病的CA125值也时有升高。
(2)AFP:对卵巢内胚窦瘤有特异性价值,含内胚窦瘤成分的混合瘤,无性细胞瘤和胚胎瘤,部分未成熟畸胎瘤也可升高,AFP可以作为生殖细胞瘤治疗前后及随访的重要标记物,正常值<29y8/L。
(3)HCG:原发性卵巢绒癌成分的生殖细胞瘤患者血中HCG异常升高,正常非妊娠妇女血清B亚单位的HCG值阴性或<3.1mg/ml。
(4)CEA:有些卵巢恶性肿瘤晚期,特别是黏液性囊腺癌CEA异常升高,但并非卵巢肿瘤的特异性抗原。
(5)LDH:部分卵巢恶性肿瘤血清中LDH升高,特别是无性细胞瘤常常升高。
但并非卵巢肿瘤特异性指标。
(6)性激素:粒层细胞瘤,卵泡膜瘤可产生较高水平雌激素;黄素化时,也可以分泌睾丸素,浆液性,黏液性或纤维上皮瘤有时也可以分泌一定量的雌激素。
3.流式细胞仪细胞DNA测定 流式细胞术(Fcm)方法通过流式细胞仪分析DNA之方图了解肿瘤DNA含量,卵巢恶性肿瘤DNA含量与肿瘤的组织学分类,分级,临床分期,复发及生存率相关,Khoo对53例Ⅲ期卵巢恶性肿瘤进行Fcm检查,发现其中30%肿瘤为DNA二倍体,那些二倍体肿瘤患者生存率(65%)明显优于异二倍体(31%),Vergote探讨290例Ⅰ期上皮性卵巢恶性肿瘤预后与DNA倍体的关系,发现二倍体肿瘤多为Ⅰ期G1,黏液性或宫内膜样癌,而异二倍体肿瘤多为Ⅰc期G3,浆液性或透明细胞癌,低危组(二倍体肿瘤)无复发,而高危组(异二倍体肿瘤)中25%复发,Trope等认为DNA倍体分析是仅次于组织学分级的重要预后指标。
影像学检查
1.超声检查 是诊断卵巢肿瘤的重要手段,可以判断肿瘤大小,部位,质地,与子宫的关系及有无腹水等,良恶性的判断依经验而定,可达80%~90%,但肿瘤在2cm以下者超声诊断困难,阴道超声检查,特别是阴道彩色多普勒超声检查可以显示肿瘤内血流变化,为鉴别良性与恶性提供参考。
2.CT,及MRI检查 对判断肿瘤大小,质地,与盆腔各脏器之间的关系,特别对盆腔和主动脉旁淋巴结增大有一定价值。
3.淋巴管造影 可显示髂脉管和腹主动脉旁淋巴结及其转移征象,提供术前估价及淋巴结清扫术准备。
4.必要时选择以下检查
胃镜,结肠镜:以鉴别原发性胃肠道原发癌的卵巢转移癌。
静脉肾盂造影:了解肾脏的分泌和排泄功能,泌尿道压迫和梗阻症状。
放射免疫显像:用放射性核素标记抗体为肿瘤阳性显像剂,进行肿瘤定位诊断。
腹腔镜检查:对临床难以定性的盆腔肿块,腹水患者腹腔镜检取活检,取腹水做病理学和细胞学检验定性及初步临床分期。
流式细胞仪诊断白血病的意义
白血病是常见的恶性肿瘤之一, 其分型 80 年代以前主要是依靠形态学, 近年利用流式细胞仪进行免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。
流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体(McAb)作分子探针,多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型,由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度,可根据抗原的表达情况评估病情和预后,可监测病程的发展,疗效,可进行微小残留白血病的检测。
对流式免疫分型结果的解释最好与临床、形态学、细胞遗传等其他方法综合考虑。从而为临床合理治疗、判断预后提供了重要的科学依据。
卵巢肿瘤出现了要做什么检查
1.腹水细胞学检查:下腹髂窝穿刺,如腹水少可经后穹隆穿刺,抽腹水查癌细胞。
2.肿瘤标记物测定:
(1)CA125:对诊断卵巢上皮性癌有重要参考价值,特别是浆液性囊腺癌,其次是宫内膜样癌,浆液性囊腺癌的检测阳性率在80%以上,90%以上CA125水平随病情缓解或恶化而消长,因此还可以作为治疗后的监测,晚期卵巢癌阳性率高,但Ⅰ期卵巢恶性肿瘤阳性率仅50%,临床上CA125≥35U/ml为阳性标准,CA125并非特异性,部分妇科非恶性疾病如急性盆腔炎,子宫内膜异位症,盆腹腔结核,卵巢囊肿,子宫肌瘤及一些非妇科疾病的CA125值也时有升高。
(2)AFP:对卵巢内胚窦瘤有特异性价值,含内胚窦瘤成分的混合瘤,无性细胞瘤和胚胎瘤,部分未成熟畸胎瘤也可升高,AFP可以作为生殖细胞瘤治疗前后及随访的重要标记物,正常值<29μg/L。
(3)HCG:原发性卵巢绒癌成分的生殖细胞瘤患者血中HCG异常升高,正常非妊娠妇女血清B亚单位的HCG值阴性或<3.1mg/ml。
(4)CEA:有些卵巢恶性肿瘤晚期,特别是黏液性囊腺癌CEA异常升高,但并非卵巢肿瘤的特异性抗原。
(5)LDH:部分卵巢恶性肿瘤血清中LDH升高,特别是无性细胞瘤常常升高。
3.非卵巢肿瘤特异性指标:
性激素:粒层细胞瘤,卵泡膜瘤可产生较高水平雌激素;黄素化时,也可以分泌睾丸素、浆液性、黏液性或纤维上皮瘤有时也可以分泌一定量的雌激素。
4.流式细胞仪细胞DNA测定:流式细胞术(Fcm)方法通过流式细胞仪分析肿瘤DNA含量,卵巢恶性肿瘤DNA含量与肿瘤的组织学分类、分级、临床分期、复发及生存率相关。
影像学检查
1.超声检查:是诊断卵巢肿瘤的重要手段,可以判断肿瘤大小、部位、质地,与子宫的关系及有无腹水等,良恶性的判断依经验而定,可达80%~90%,但肿瘤在2cm以下者超声诊断困难,阴道超声检查,特别是阴道彩色多普勒超声检查可以显示肿瘤内血流变化,为鉴别良性与恶性提供参考。
2.CT及MRI检查:对判断肿瘤大小、质地,与盆腔各脏器之间的关系,特别对盆腔和主动脉旁淋巴结增大有一定价值。
3.淋巴管造影:可显示髂脉管和腹主动脉旁淋巴结及其转移征象,提供术前估价及淋巴结清扫术准备。
4.必要时选择以下检查
胃镜、结肠镜:以鉴别原发性胃肠道原发癌的卵巢转移癌。
静脉肾盂造影:了解肾脏的分泌和排泄功能,泌尿道压迫和梗阻症状。
放射免疫显像:用放射性核素标记抗体为肿瘤阳性显像剂,进行肿瘤定位诊断。
腹腔镜检查:对临床难以定性的盆腔肿块,腹水患者腹腔镜检取活检,取腹水做病理学和细胞学检验定性及初步临床分期。
白血病的血常规有哪些指标
白血病大多数的患者以发热为早期表现。可低热,亦可高达39~40℃以上,伴畏寒、出汗等。也会伴有有头痛、恶心、呕吐,这是已有中枢神经系统白血病的表现。骨和骨膜的白血病浸润引起骨痛,可为肢体或背部弥漫性疼痛,亦可局限于关节痛,常导致行动困难。
对于患者在检查时候,常常根据其血常规指标来判断。经骨髓形态学、细胞化学染色、流式细胞学确诊在血液分析仪上检测,得到血细胞数值、警示异常细胞信息、白细胞直方图、白细胞散点图。一般患者的白细胞计数上升,血红蛋白上升占部分。血小板上升较多。
白血病的血常规有哪些指标
血常规俗称血象,最重要的三个指标是血红蛋白(hb)、白细胞(wbc)、血小板(plt或bpc)。
一、有无贫血,看血红蛋白
血红蛋白(hb)正常值:男性120~160g/l女性110~150g/l新生儿170~200g/l,低于正常值为贫血。
再看平均红细胞体积和平均红细胞血红蛋白含量。平均红细胞体积(mcv),正常值:手工法82~92fl;血细胞分析仪法80~100fl。平均红细胞血红蛋白含量(mch):手工法27~31pg;血细胞分析仪法27~34pg。如果两者均低于正常,考虑是否有缺铁性贫血或地中海贫血,后者为遗传性疾病,发生率低,多见于云贵、广西广东等地区。如果平均红细胞体积高于正常,考虑是否有营养性巨幼红细胞性贫血、骨髓增生异常综合征、多发性骨髓瘤(骨髓瘤由于红细胞呈缗钱样重叠,平均红细胞体积也增高)。需要骨髓象检查。
如果平均红细胞体积和平均红细胞血红蛋白含量均正常。要做网织红细胞检查。网织红细胞计数正常值:0.5%-1.5%。低于正常,考虑是否有骨髓造血障碍,明显高于正常,是否有溶血,要做进一步检查。
失血性贫血极为常见,慢性或急性出血引起。
黑色素瘤的常见临床检查
临床上,黑色素瘤的检查方法有:
X线检查:
对可能的、无症状肺部转移应进行胸部X线检查。如提示转移,应用肺部断层摄片或CT扫描证实。
病理检查:
是诊断黑色素瘤的可靠手段,也是鉴别诊断的主要方法。临床对可疑病灶在条件允许时应切除包括整个肿瘤厚度以及皮肤各层所浸润组织,并进行活检以获病理诊断。切忌针吸、刮片、钳取、切取或凿孔取样活检,以防病灶扩散。
CT检查:
对可疑脑转移时应做头颅CT检查。
电镜检查:
可观察到恶性黑色素瘤在不同发展阶段的黑素体,具有特征性,可与其他肿瘤细胞和噬黑素细胞鉴定,观察免疫酶标(S-100),单抗HMB-45及流式细胞DNA分析,对确诊恶性黑色素瘤有诊断价值。
血清碱性磷酸酶或乳酸脱氢酶测定:
有助于评估可能的肝脏受累,或有增高或有体重减轻、厌食、上腹部疼痛等症状者,应进行肝脏B超、腹部CT扫描。
免疫力检测方式方法
免疫力检测方式方法:
一、 目前常用的有关免疫力的检查
1 常规血液学检查——依据白细胞及淋巴细胞比例来判断免疫力状况,缺点是参考范围广,无法精确判断免疫力状况。
2 淋巴细胞的检查——免疫细胞的活性检测,如淋巴细胞转化实验,根据淋巴细胞转化程度测定免疫应答功能。但功能需结合细胞定量检查,结果更可靠。 3 淋巴细胞亚群检查——免疫细胞的定量检测,如CD3、CD4、CD8、CD19等的检测,通过精确免疫细胞数值变化,评估免疫状况。通常采用流式细胞仪,特别针对CD4,此方法也称金标法。
二 免疫功能检查(细胞及体液免疫)
1 淋巴细胞转化(增殖活性)试验。人类淋巴细胞在体外与特异性抗原(如结
核菌素)或非特异性有丝分裂原(如植物血凝素,PHA)等一起孵育,T细胞即被激活而向淋巴母细胞转化。通过计算淋巴母细胞的转化率,了解机体的细胞免疫功能。
2 酶联接免疫吸附剂测定(ELISA方法检测各类免疫球蛋白。免疫球蛋白是检查机体体液免疫功能的一项重要指标。人类的免疫球蛋白分为五类,即lgG、lgA.lgM、IgD和lgE,我们常规所测定的Ig主要为lgG、lgA.IgM三项。
三 免疫细胞定量检查仪器——流式细胞仪
工作原理
流式细胞仪主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,然后进行电子存储,以后数据可以调出显示和进行分析。 报价 流式细胞仪:大多7万到10万美金之间
进口抗体:T细胞 Anti-Human CD4(25人次) 800元左右 Anti-Human CD8(25人次) 1200元左右 Anti-Human CD3(25人次) 1000元左右 B细胞 anti-human CD19(25人次)1000元左右 NK细胞 anti-human CD56(25人次)1000元左右
四 临床检验开展的免疫学检查项目: T细胞计数 T细胞亚群测定
T细胞增殖活性检查 B细胞计数
B细胞增殖活性检查 自然杀伤细胞的计数
自然杀伤细胞抗肿瘤活性检测
临床检验有关流式细胞仪免疫细胞的检查项目: 临床检查项目 临床意义 价格 T、B淋巴细胞亚群检查:CD3/CD4/CD8/ CD19
了解不同疾病患者的免疫功能,已广泛应用于肿瘤、自体免疫、感染性疾病,辅助临床诊断、了解发病机理、判断预后和指导临床治疗 200元左右 自然杀伤细胞(NK)检测:CD3/CD(16+56) NK细胞通过自然杀伤和NDCC发挥细胞毒作用,是机体抗肿瘤、抗感染的重要免疫因素 100元左右 IgA/IgG/IgM 国产900元左右(48人 )。
卵巢肿瘤的检查
1.腹水细胞学检查
下腹髂窝穿刺,如腹水少可经后穹隆穿刺,抽腹水查癌细胞。
2.肿瘤标志物测定
(1)CA125 对诊断卵巢上皮性癌有重要参考价值,特别是浆液性囊腺癌,其次是宫内膜样癌。浆液性囊腺癌的检测阳性率在80%以上,90%以上CA125水平随病情缓解或恶化而消长,因此还可以作为治疗后的监测。临床上CA125≥35U/ml为阳性标准。CA125并非特异性,部分妇科非恶性疾病如急性盆腔炎、子宫内膜异位症、盆腹腔结核、卵巢囊肿、子宫肌瘤及一些非妇科疾病的CA125值也时有升高。
(2)AFP 对卵巢内胚窦瘤有特异性价值。含内胚窦瘤成分的混合瘤、无性细胞瘤和胚胎瘤,部分未成熟畸胎瘤也可升高。AFP可以作为生殖细胞瘤治疗前后及随访的重要标志物。正常值<29µg/L。
(3)HCG 原发性卵巢绒癌成分的生殖细胞瘤患者血中HCG异常升高,正常非妊娠妇女血清B亚单位的HCG值阴性或<3.1mg/ml。
(4)CEA 有些卵巢恶性肿瘤晚期,特别是黏液性囊腺癌CEA异常升高。但并非卵巢肿瘤的特异性抗原。
(5)LDH 部分卵巢恶性肿瘤血清中LDH升高,特别是无性细胞瘤常常升高,但并非卵巢肿瘤特异性指标。
(6)性激素 粒层细胞瘤、卵泡膜瘤可产生较高水平雌激素;黄素化时,也可以分泌睾丸素。浆液性、黏液性或纤维上皮瘤有时也可以分泌一定量的雌激素。
3.流式细胞仪细胞DNA测定
流式细胞术(Fcm)方法通过流式细胞仪分析DNA之方图了解肿瘤DNA含量。卵巢恶性肿瘤DNA含量与肿瘤的组织学分类、分级、临床分期、复发及生存率相关。
4.影像学检查
(1)超声检查 是诊断卵巢肿瘤的重要手段。可以判断肿瘤大小、部位、质地、与子宫的关系及有无腹水等。
(2)CT及MRI检查 对判断肿瘤大小、质地、与盆腔各脏器之间的关系,特别对盆腔和主动脉旁淋巴结增大有一定价值。
(3)淋巴管造影 可显示髂脉管和腹主动脉旁淋巴结及其转移征象,提供术前估价及淋巴结清扫术准备。
5.其他
(1)胃镜、结肠镜 以鉴别原发性胃肠道原发癌的卵巢转移癌。
(2)静脉肾盂造影 了解肾脏的分泌和排泄功能,泌尿道压迫和梗阻症状。
(3)放射免疫显像 用放射性核素标记抗体为肿瘤阳性显像剂,进行肿瘤定位诊断。
(4)腹腔镜检查 对临床难以定性的盆腔包块,腹水患者腹腔镜检取活检,取腹水做病理学和细胞学检验定性及初步临床分期。